Far-western blot
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Ein Far-Western-Blot ist eine biochemische Methode zum Nachweis von Protein-Protein-Interaktionen.
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The far-western blot, or far-western blotting, is a molecular biological method based on the technique of western blot to detect protein-protein interaction in vitro. Whereas western blot uses an antibody probe to detect a protein of interest, far-western blot uses a non-antibody probe which can bind the protein of interest. Thus, whereas western blotting is used for the detection of certain proteins, far-western blotting is employed to detect protein/protein interactions.
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파-웨스턴 블롯(영어: far-western blot)은 시험관에서 단백질-단백질 간의 작용을 확인하기 위한 것으로 웨스턴 블롯 기술에 기반을 둔다. 일반적인 웨스턴 블롯이 관심있는 단백질을 검출하는데 항체를 이용하는 반면, 파-웨스턴 블롯은 관심 단백질과 반응할 수 있는 항체가 아닌 단백질을 이용한다. 그러므로 웨스턴 블롯이 특정 단백질의 검출에 이용된다면, 파-웨스턴 블롯은 단백질-단백질 반응을 검출하는데 이용된다.
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Le far Western (ou far overlay) vise à détecter des interactions entre deux protéines X et Y.Cette technique dérive d’un Western Blot classique. Nous pouvons discriminer plusieurs étapes: 1-SDS-PAGE ou PAGE soit à partir d’un extrait protéique contenant la protéine X soit à partir de la protéine X purifiée (c'est-à-dire isolée). 2- Transfert sur membrane : la protéine X est alors fixée à la membrane.Remarque : si l'électrophorèse a été une SDS-PAGE, il faut d'abord laver la membrane dans une solution adéquate afin de permettre la renaturation des protéines qui y sont. 4- Lavage
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Far-Western-Blot
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Far-western blot
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Far-western blot
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파-웨스턴 블로팅
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Ein Far-Western-Blot ist eine biochemische Methode zum Nachweis von Protein-Protein-Interaktionen.
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The far-western blot, or far-western blotting, is a molecular biological method based on the technique of western blot to detect protein-protein interaction in vitro. Whereas western blot uses an antibody probe to detect a protein of interest, far-western blot uses a non-antibody probe which can bind the protein of interest. Thus, whereas western blotting is used for the detection of certain proteins, far-western blotting is employed to detect protein/protein interactions.
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Le far Western (ou far overlay) vise à détecter des interactions entre deux protéines X et Y.Cette technique dérive d’un Western Blot classique. Nous pouvons discriminer plusieurs étapes: 1-SDS-PAGE ou PAGE soit à partir d’un extrait protéique contenant la protéine X soit à partir de la protéine X purifiée (c'est-à-dire isolée). 2- Transfert sur membrane : la protéine X est alors fixée à la membrane.Remarque : si l'électrophorèse a été une SDS-PAGE, il faut d'abord laver la membrane dans une solution adéquate afin de permettre la renaturation des protéines qui y sont. 3- Incubation de la membrane avec la protéine Y, celle-ci devant obligatoirement être purifiée. 4- Lavage 5- Révélation avec des anti-corps anti-protéine Y.Remarque : si l'on ne dispose pas d'anti-corps anti-Y, on peut lui accrocher une séquence FLAG (petite protéine ou peptide contre lequel des anticorps sont disponibles).
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파-웨스턴 블롯(영어: far-western blot)은 시험관에서 단백질-단백질 간의 작용을 확인하기 위한 것으로 웨스턴 블롯 기술에 기반을 둔다. 일반적인 웨스턴 블롯이 관심있는 단백질을 검출하는데 항체를 이용하는 반면, 파-웨스턴 블롯은 관심 단백질과 반응할 수 있는 항체가 아닌 단백질을 이용한다. 그러므로 웨스턴 블롯이 특정 단백질의 검출에 이용된다면, 파-웨스턴 블롯은 단백질-단백질 반응을 검출하는데 이용된다.
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